دراسة تأثير مستحضرات ليبوزوم مطورة لعقار المورفين على خاصية تخدير المورفين عند الفئران

العتيبي, طلق راجح عبد الوهاب الدماسي ; Alotaibi, Talq Rajih ; بكداش, عبد السلام أحمد . مشرف رئيس ; الحلواني, ماجد عبد العزيز . مشرف مساعد (2021)

رسالة ماجستير - جامعة نايف العربية للعلوم الأمنية، كلية علوم الأدلة الجنائية، قسم الكيمياء الجنائية، تخصص تحليل السموم.

61 ورقة : جداول، أشكال

مستخلص المادة العلمية :

التساؤل الرئيسي: ما التأثير المحتمل لمستحضرات ليبوزوم مطورة لعقار المورفين على خاصية تخدير المورفين عند الفئران؟

والأسئلة الفرعية: ما إمكانية تطوير مستحضرات ليبوزوم لعقار المورفين بالمشاركة مع المنثول؟، وما هي نسبة التغليف للمورفين في هذه المستحضرات، وما تقييم اختبار الصفيحة الساخنة بعد تطبيق المستحضرات المطورة على الفئران؟

الهدف الرئيسي للرسالة: تقدير التأثير المحتمل لمستحضرات ليبوزوم مطورة لعقار المورفين على خاصية تخدير المورفين عند الفئران.

الأهداف الفرعية: تطوير مستحضرات ليبوزوم لعقار المورفين بالمشاركة مع المنثول، وتحديد نسبة التغليف للمورفين في هذه المستحضرات، وتقييم اختبار الصفيحة الساخنة بعد تطبيق المستحضرات المطورة على الفئران؟

عينة الدراسة: فئران التجارب ألبينو السويسرية، ومادة الدراسة العيارية المورفين، ومستحضرات الليبوزوم المطورة.

منهج الدراسة وأدواتها: اتبع المنهـج العلمـي التـجريبي من أجـل تحقـيق أهـداف الدراسـة والإجابـة عـن تسـاؤلاتها. من خلال تطوير مستحضرات الليبوزوم في مختبرات مركز الملك عبد الله العالمي للأبحاث الطبية، ودراسة نسبة التغليف للمورفين في هذه المستحضرات في مختبرات قسم علوم الأدلة الجنائية بجامعة نايف العربية للعلوم الأمنية، ودراسة تقييم اختبار الصفيحة الساخنة عند الفئران في مختبرات كلية الصيدلة بجامعة الملك سعود.

النتائج: جرى تحضير صيغتين مطورتين لمستحضر الليبوزوم لكل من المورفين _ المينتول باستخدام نسب مختلفة من كل منDSPC:DPPC:Chol:Menthol (9.4:9.2:4.8:2) للصيغة الأولى وDSPC:Chol:DMPC:Menthol (9.4:4.8:2.2:2) للصيغة الثانية، وتم تقدير المورفين في هذه الصيغ باســـــــتخدام التخفيف مع الطور المتحرك والحقن بطريقة HPLC-UV. وجرى التحقق من صلاحية العمل بانتقائية مقبولة وخطية مقبولة مع معامل ارتباط R² = 0.99 ضمن مجال 0.1-50 µg/mL . مع معدل استرداد بمتوسط 97%، وقيم LOD و LOQ 0.01, 0.1 µg/mLعلى التوالي. وكانت قيم الدقة (RSD%) وقيم الصحة (التحيز) مقبولة خلال اليوم الواحد (RSD٪ ؛ 3.468 إلى 9.658٪) والتحيز (-10.600 إلى 14.100%)، وكذلك الدقة والصحة خلال أيام مختلفة (RSD٪ ؛ 1.897 -13.268٪) والتحيز (-10.600 -14.100٪). مع نسب تغليف للمورفين ضمن المستحضر الليبوزومي جيدة بقيمة 63.406٪ و61.073٪ للصيغة الأولى والصيغة الثانية على التوالي. وأكدت نتائج اختبار الصفيحة الساخنة عند الفئران بجرعة 5mg/Kg وجود تأثير ذو دلالة إحصائية لكلا الصيغتين بإحداث التخدير وإطالة زمن الاستجابة للإحساس بالألم، بالمقارنة مع المجموعات الضابطة، وهذا يفسر بنجاح كلا الصيغتين المطورتين في إحداث التأثير الفيزيولوجي المطلوب.

أهم التوصيات: - العمل على الاستفادة من نتائج الدراسة وخصائص المستحضرات الليبوزومية المتعددة في تحضير العقاقير والأدوية. - تطوير طرق مستحضرات ليبوزومية لأنواع المخدرات الأخرى.

The study main question: What is the potential effect of developed-morphine in liposome formulations on the anesthetic property of morphine in mice?

Sub-question: What is the possibility of developing morphine in liposomal formulations in combination with menthol? What is the percentage of morphine encapsulation in these liposomal formulations? What are the mice responses on hot plate test after applying the developed liposomal formulations?

Main objective: to study the potential effect of developed-morphine in liposome formulations on the anesthetic property of morphine in mice

Specific objective: To develop morphine in liposome formulations with combination of menthol. In addition, to determine the encapsulation percentage of morphine in these preparations. Finally, to evaluate the mice responses on hot plate test after applying the developed-morphine in liposome formulations?

Study samples: Swiss alpino lab mice, standard morphine, and the developed liposome formulations.

Study Methodology and Tools: The scientific experimental method was applied to answer the study's questions and achieving its goals. First of all, liposome formulations were prepared in the laboratories of the King Abdullah International Center for Medical Research. The morphine encapsulation inside liposomal formulations was determined in the laboratories of the Department of Forensic Sciences at Naif Arab University for Security Sciences. Mice responses on the hot plate test was done in the laboratories of the College of Pharmacy at King Saud University.

Results: Two formulas were developed for encapsulate Morphine inside liposomal-Menthol formulations by using different phospholipids. First formula were contained DSPC:DPPC:Chol:Menthol, where the second formula contained DSPC:Chol:DMPC:Menthol. after dilution with the mobile phase the detection and quantification using HPLC-UV method was done. Linearity was studied within the range of 0.1-50 μg/mL with R² = 0.99. Accuracy (Bias%) and precision (RSD%) were obtained for QC concentration 2, 20 and 40 μg/mL. The extraction recovery rates were very good about 97%. LOD and LOQ were 0.01 and 0.1 μg/mL respectively. The obtained RSD% and bias values were acceptable at all concentrations for intra-day precision (RSD%; 3.468 to 9.658%) and bias (-10.600 to 14.100), as well as for the inter-Day precision (RSD%; 1.897 to 13.268%) and bias (-10.600 to 14.100%). The encapsulation ratios of Morphine were in the range of 60-65%, 63.406% and 61.073% for the formula 1 and formula 2 respectively. The results of the hot plate test (Swiss Alpino mice, dose 5mg/kg) confirmed the existence of a statistically significant effect of both formulations by inducing anesthesia and prolonging the response time for pain sensation, compared to the control groups, and this explains the success of both developed formulas in producing the required physiological effect.

Recommendations: -The results of the study recommend to study multiple characteristics of liposome formulation to reach the best fit formula for morphine. - Use this drug delivery systems with other drugs to reduce its addiction effects.