Developing an Analytical Method for the Analysis of AMB-FUBINACA in Mice Brain using GC-MSMS

الغامدي, ملاك بنت عبد الرحيم سعيد آل عبد الرحيم ; Al-Ghamdi, Malak Abdulrahim ; بكداش, عبد السلام أحمد . مشرف رئيس ; كومار, ساشيل . مشرف مساعد (2020)

رسالة (ماجستير)-جامعة نايف العربية للعلوم الأمنية، كلية علوم الأدلة الجنائية، قسم الكيمياء الجنائية، تخصص تحليل السموم.

77 ورقة : جداول، أشكال

Thesis

The main question of the study: Is it possible to determine the FUB-AMB quantitatively and qualitatively in mice brain tissue? From this question three key questions emerge: - How efficient is the extraction method of FUB-AMB from the brain tissue? - Can the GC-MS/MS method prove its validation? - Will the analytical method succeed in its application to real samples?

Specific objectives: - Testing extraction method of the synthetic cannabinoids AMB-FUBINACA from the mice-brain tissue using the GC-MS/MS. - Validating the analytical method by applying the necessary validation parameters. - Applying the developed analytical method to real samples.

Study samples: Male Swiss albino mice were used in this research. AMB-FUBINACA reference substance and Internal Standards were obtained from Cayman Chemical (Ann Arbor, MI, USA). This work was carried out in the laboratory of the Department of Forensic Sciences of the Naif Arab University for Security Sciences.

Study Methodology and Tools: The experimental scientific approach was applied in answering the study's questions and to achieve its objectives. AMB-FUBINACA was extracted from the mice brain using liquid-liquid extraction (LLE). Finally, an analytical method for the analysis of samples using GC/CI-MS/MS-MRM Mode was developed and validated.

Results: The mice (n=18) were divided into three groups: group 1, control (without administration of AMB-FUBINACA); group 2, treated orally with low dose of (5 mg/kg) of AMB-FUINACA; group 3, treated orally with high dose (50 mg/kg) of AMB-FUBINACA. A LLE extraction using ethyl acetate as extraction solution was followed by GC/CI-MS/MS-MRM analysis were applied to analyze AMB-FUBINACA in brain samples. The results showed that the method used was highly efficient in terms of extraction, detection, and quantification. The limit of detection (LOD) was 0.5 ng/g, and the limit of quantitation (LOQ) was 1 ng/g. The linearity of the analytical method was within the range of 1-1000 ng/mL, and the correlation coefficient (r²) was 0.99. No interference of the matrix was observed at the retention time of all mentioned ions of substances, intra-day precision was (%RSD; 1.28 to 7.51%) and the intra-day accuracy was (-10.75 to -0.423), the inter-day precision was (%RSD; 2.31 to 4.4%) and the inter-day accuracy was (-8 to -1.9%). The extraction recovery was 76%.

Recommendations: • To implement the analytical method used in the study in the forensic and clinical toxicology laboratories for the identification and determination of the drug (AMB-FUBINACA) in brain samples.

التساؤل الرئيسي: هل يمكن تطويرطريقة تحليلة لاســــــــتخلاص القنب المصمم المدروس في عينات الدماغ والمقترنة بتقنية GC–MS/MS؟ ويتفرع من التساؤل الرئيس الأسئلة الفرعية التالية: ما مدى فاعلية طريقة استخلاص القنب المصمم المدروس من عينات دماغ الفئران؟ وما مدى صلاحية الطريقة التحليلية المستخدمة؟ وهل تحقق الطريقة نجاح بعد تطبيقها على العينات الحقيقية؟

الهدف الرئيسي للرسالة: تهدف هذه الدراسة إلى تطوير طريقة تحليل بالاســــــــتخلاص السائل للقنب المصمم المدروس في عينات الدماغ والمقترنة بتقنية GC–MS/MS. الأهداف الفرعية: عملت الدراسة على تحقيق الأهداف التالية: تطوير طريقة استخلاص مناسبة للقنب المصمم المدروس، وتطوير طريقة كشف وتقدير للقنب المصمم المدروس باستخدام GC–MS/MS، والتحقق من صلاحية الطريقة التحليلية المستخدمة ومن ثم تطبيقها على عينات حقيقية.

عينة الدراسة: اســــــتخدم محلول قياسي لعقار الدراسةAMB-FUBINACA وعينات دماغ مأخوذة من فئران التجارب البيضاء السويسرية، وأجريت الدراســـــة في مختبرات كلية علوم الأدلة الجنائية بجامعة نايف العربية للعلوم الأمنية.

منهج الدراسة وأدواتها: تم تطبيق المنهج العلمي التجريبي في الإجابة عن تساؤلات الدراسة وتحقيق أهدافها، وذلك بتحضير عينات عقار الدراسة AMB-FUBINACA في عينات الدماغ ومن ثم العمل على تطوير طريقة تحليلية بالاستخلاص السائل وتحليل العينات بواسطة تقنية GC/CI-MS/MS-MRM Mode.

النتائج: اسـتخدمت طريقة الاسـتخلاص الســـــــائل بمحلول الاستخلاص أسيتات الإيثيل وتم تحليل العينات بواسطة تقنيةGC/CI-MS/MS-MRM Mode لعقار AMB-FUBINACA في عينات الدماغ وأوضحت النتائج أن الطريقة المستخدمة ذات كفاءة عالية من حيث الاستخلاص بنسبة استرداد استخلاص تعادل 76%، ومن حيث الكشف والتقدير حيث كان حد الكشف الأدنى(LOD)0.5 ng/g وحد التقدير الكمي (LOQ)1 ng/g فيما حققت الطريقة التحليلية خطية ضمن المجال (1-1000) ng/g بمعامل ارتباطr² = 0.99، وكانت قيمة الدقة ليوم واحد (%RSD; 1.28 to 7.51%) وقيمة الدقة لعدة أيام مختلفة (%RSD; 2.31 to 4.4%) وكانت قيمة الصـحة ليوم واحد (-10.75 to -0.423) وقيمة الصحة لعدة أيام مختلفة (-8 to -1.9%).

أهم التوصيات: العمل على تطبيق الطريقة التحليلية المسـتخدمة في الدراسة في معامل السـموم الجنائية والسريرية للتقدير الكمي والنوعي لعقار(AMB-FUBINACA) في الدماغ.